Анализ кала на кишечную группу

Бактериофаги – уникальные микроорганизмы. Их антибактериальная активность достигается внедрением в клетку возбудителя, последующим размножением и распадом бактерии. Для лечения бактериальных заболеваний могут применяться либо антибиотики, либо бактериофаги, либо проводят совместную терапию. В каких случаях необходимо назначать антибиотики, а когда – бактериофаги? Все ответы в нашей статье.

Зачем делать анализ

Одна из ключевых проблем, послужившая развитию антибиотикорезистентности бактерий, – неправильное применение антибиотиков или противомикробных препаратов.

Когда к врачу обращается пациент с острым течением заболевания, антибиотики в большинстве случаев назначают сразу, без предварительного определения чувствительности возбудителя.

Специалист назначает антибиотик исходя из собственного опыта, учитывая рекомендации по активности препарата в отношении бактерий, наиболее часто вызывающих данное заболевание. Выбор антибиотика зачастую продиктован клинической ситуацией: необходимо устранить острые симптомы воспаления, что возможно только при ликвидации микроорганизма как причины, его вызывающей. Одновременно с назначением антибиотика врач направляет на анализ по определению чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам и бактериофагам. Результаты анализа обычно готовы в течение 3–4-х дней.

Если врач по каким-либо причинам не назначил анализ на чувствительность к антибиотикам и бактериофагам, вы можете сделать его по своему желанию в клинической лаборатории, где проводят такие тесты. image

Важные требования к подбору антибактериального препарата на первом этапе: правильная дозировка, узкий спектр активности. Корректное назначение антибиотика определяет возможность формирования к нему устойчивости у бактерий. К сожалению, часто случается наоборот: некорректно назначенный препарат катализирует процесс мутаций у бактерий и формирует устойчивость их к антибиотикам.

Резистентность к противомикробным средствам – серьезная проблема, представляющая угрозу для здоровья людей во всех регионах нашей планеты. Однако появление микроорганизмов, стойких к антибиотикам, послужило толчком к активному изучению бактериофагов.

Препараты бактериофагов рассматривают как альтернативу антибиотикам. В отличие от антибактериальных препаратов бактериофаги воздействуют только на возбудителя заболевания, не затрагивая нормальную флору человеческого организма. Препараты бактериофагов можно принимать в сочетании с другими антибактериальными средствами, что усиливает противобактериальный эффект и позволяет снизить дозу антибиотика.

Совместное назначение бактериофагов с противовирусными препаратами противопоказано.

Чтобы достичь нужного эффекта при лечении любым антибактериальным препаратом и препаратом бактериофага, необходимо пройти тест на чувствительность возбудителя.

Как проводят тест

Принцип определения чувствительности бактерий к антибиотикам и бактериофагам одинаковый. На первом этапе работают с бактериями, выделенными из патологического содержимого – раны, мочи, мазка со слизистой. Далее в питательную среду добавляют антибиотики разных групп и бактерии.

Антибиотикограмму – перечень антибактериальных препаратов, к которым чувствителен выделенный возбудитель, получают с помощью современных стандартизованных методов: серийных разведений или диффузионных методов (диско-диффузионных и Е-тестов).

image Метод серийных разведений Антибиотик в различных разведениях помещают в жидкую питательную среду (бульон) или агар, куда добавляют бактериальную суспензию. По наличию или отсутствию роста микроорганизмов в питательной среде оценивают эффективность антибиотика, определяют его минимальную подавляющую концентрацию. Диско-диффузионный метод В питательную среду с ранее внесенной бактериальной суспензией помещают бумажные диски с антибиотиками. Вследствие диффузии антибиотика происходит подавление роста микроорганизмов, и по диаметру зон задержки роста судят о чувствительности культуры. Е-тест Это полоска, на которую нанесен градиент концентрации антибиотика. Исследование проводят аналогично диско-диффузионному методу. Метод слепого пятна Классический тест на определение чувствительности к бактериофагам. В клинических лабораториях и на производстве применяют метод титрования. Выделенные из патологического содержимого бактерии засевают в питательную среду вместе с бактериофагом. Появление стерильных округлых пятен говорит о лизисе (растворении клеток) бактерий с образованием колоний бактериофагов. Просветление среды (формирование прозрачных зон) подтверждает чувствительность бактерий к бактериофагу. По спектру действия выделяют моновалентные бактериофаги, которые лизируют бактерии одного вида, и поливалентные – разрушающие бактерии нескольких видов.

Расшифровка результатов анализа

На бланке теста будут обозначения в виде букв R или S. R (Resistant) – резистентность бактерий к данному бактериофагу или антибиотику, S (Sensitive) – чувствительность возбудителя к препарату.

Если результат теста R, лечение данным фаговым препаратом неэффективно, S говорит о том, что бактериофаг или антибиотик можно назначать. Если возбудитель чувствителен к определенной группе антибиотиков и резистентен к бактериофагу, назначают антибактериальные препараты, и наоборот.

Тест на антибиотико- и фагочувствительность помогает определить, справится препарат с возбудителем инфекции или нет. Это важный показатель, на который ориентируются специалисты при выборе схемы лечения.

АО «НПО «Микроген» выпускает широкий спектр бактериофагов, что расширяет возможности фаготерапии и позволяет корректно подобрать препарат, к которому чувствительны патогенные бактерии.

Кликните на аптеку, чтобы сразу перейти к покупке препарата: Свяжитесь с нами Ваш вопрос отправлен.

Спасибо за то, что задали свой вопрос.

Ваша заявка отправлена.

Спасибо за проявленный интерес.

Вы подписаны на рассылку! Спасибо! Ваше сообщение отправлено.

Качеровская Е.Р. врач лабораторной диагностики;

Чиж О.В.врач лабораторной диагностики

Нормальная микрофлора кишечника выполняет функцию экологического барьера, предотвращающего его колонизацию патогенными микроорганизмами.

Нарушение нормальной микрофлоры при принятии антибиотиков может привести к чрезмерному росту эндогенных или нозокомиальных патогенных микроорганизмов, таких как Clostridium difficile.

  1. difficile является основным этиологическим агентом псевдомембранозного колита, связанного с приемом антибиотиков. Псевдомембранозный колит (ПМК) — острое заболевание кишечника, развивающееся как осложнение антибактериальной терапии и характеризующееся наличием бляшковидных и узелковых псевдомембран в толстом кишечнике (чаще в дистальном отделе ободочной кишки и сигмовидной кишки). При отсутствии лечения исход может быть летальным. Помимо ПМК, C. difficile может быть ассоциирована с более легкими формами колита — антибиотикассоциированный колит (ААК) и антибиотикассоциированная диарея (ААД) на фоне приема антибиотиков.

Нозокомиальное приобретение C. difficile является серьезной проблемой медицинских учреждений, в частности, учреждений с большой плотностью стационарных больных, отделений химиотерапии, а также при долгосрочном нахождении пациентов в стационаре. Грудные дети и больные муковисцидозом являются асимптоматическими носителями токсикогенных штаммов C. difficile с частотой 50 % и 32 % соответственно.

Клиническая диагностика C. difficile основана на нескольких критериях, как правило: диарея с частотой опорожнения кишечника не менее 6 раз за 36 часов (как минимум трехкратный неоформленный стул за сутки) у пациентов, получавших антибиотикотерапию в пределах 8 недель до начала диареи, при отсутствии других очевидных причин диареи, улучшение состояния пациента при лечении.

Изоляты C. difficile могут быть как токсикогенными, так и не токсикогенными. Токсикогенные штаммы C.difficile продуцируют энтеротоксин (токсин A) и цитотоксин (токсин B) а приблизительно эквивалентных количествах.

Тем не менее, некоторые штаммы (серогруппы F) продуцируют токсин B, но не продуцируют токсин A. Эти штаммы можно не определить повсеместно используемыми методами диагностики, основанными на определении только токсина А.

Тест VIDAS C. difficile Toxin A & B (проводится в лаборатории УЗ «3-я ГКБ им.Е.В.Клумова») предназначен для диагностики заболеваний, связанных с наличием Clostridium difficile путем определения токсинов А и В C. difficile в фекалиях.

Для следующих микроорганизмов не было установлено перекрестной реактивности или интерференции при проведении теста VIDAS C. difficile Toxin A & B:

Staphylococcus aureus ssp aureus

Shigella flexneri

Shigella dysenteriae

Shigella sonnei

Salmonella group B (paratyphi B)

Salmonella enteritidis

Pseudomonas aeruginosa

Escherichia coli 0157:H7

Escherichia coli

Candida albicans

Enterococcus faecalis

Yersinia enterocolitica

Bacteroides fragilis

Campylobacter jejuni ssp jejuni

Campylobacter coli

Vibrio cholerae

Aeromonas hydrophila ssp hydrophila

Peptostreptococcus anaerobius

Porphyromonas assacchrolyticus

Clostridium sporogenes

Clostridium bifermentans

Clostridium histolyticum

Clostridium difficile (не токсикогенный) VPI 0210114

Clostridium butyricum

Clostridium subterminale

Clostridium sordelli*

Clostridium perfringens

Clostridium tertium

Clostridium tetani

Clostridium septicum

Clostridium innocuum

Clostridium novyi

Возможна перекрестная реактивность с C.sordelli VPI9048, в зависимости от условий культивирования.

Бактериологический диагноз основан на обнаружении в стуле токсинов В и/или А C. Difficile. Два золотых стандарта, исследование цитотоксичности на клеточной культуре и посев на селективную питательную среду с определением токсикогенности, занимают много времени (минимум 24-48 часов) и плохо стандартизированы.

Для повышения чувствительности и скорости диагностики в настоящее время рекомендуется двухступенчатый алгоритм. На первом этапе выявляют глутаматдегидрогеназу (ГДГ) в стуле, а на втором – подтверждают положительные результаты при помощи второго теста на обнаружение токсинов.

 Оценивая результаты тестирования,  врач должен учитывать клинические признаки и историю болезни пациента.

Правила забора кала для исследований на Clostridium difficile

Специальной подготовки к исследованию не требуется.

Ограничений в диете нет.

Соберите образец кала в чистую пробирку.

Важно: Образец должен быть собран без добавления какого-либо химического или биологического вещества в пробирку для сбора образца.

 Не используйте контейнеры для образцов, содержащие детергенты, консерванты и среды, поскольку это может привести к получению неверных результатов.

Образцы можно хранить до начала обработки в течение 3 суток (с момента взятия) при 2 — 8°C без значительной потери определяемых количеств токсинов А и В C. difficile.

Более длительное хранение при 2 — 8°C не рекомендуется.

При необходимости более длительного хранения образцы можно заморозить и хранить при -70 °C ± 10°C до 1 месяца.

Не замораживайте образцы повторно.

В ходе клинических исследований не было обнаружено интерференции при тестировании образцов, содержащих большие количества слизи или крови при определении токсинов А и В C. Difficile

При определении ГДГ возможно взаимодействие с некоторыми лекарственными средствами и другими потенциальными интерферирующими веществами (гемоглобин, липиды, муцин, амоксициллин, висмута салицилат, кальция карбонат, цефтриаксон, бензалкония хлорид, ципрофлоксацин, эритромицин, этанол, фидаксомицин, гентамицин, минеральное масло, гидрокортизон, алюминия гидроксид, магния гидроксид, лидокаин, лоперамид, месалазин, метронидазол, напроксен, нистатин, фенилэфрин, сеннозид, тергитол, тетрациклин, ванкомицин), превышающими определенные концентрации.

При получении спорного результата при определении токсинов А и В C. Difficile, рекомендуется повторить анализ с повторно взятым образцом, поскольку распределение токсинов в некоторых образцах может быть неравномерным.

Новый образец должен быть взят в течение двух недель, должен согласовываться с клинической картиной и историей болезни. При повторном получении спорного результата образец следует протестировать другим методом.

Оценивая результаты тестирования, врач должен учитывать клинические признаки и историю болезни пациента.

УЗ «3-я ГКБ им.Е.В.Клумова» проводит на платной основе исследования для диагностики заболеваний, связанных с наличием Clostridium difficile путем определения в фекалиях:

  1. глутаматдегидрогеназы (VIDAS C. Difficile GDH)
  2. токсинов А и В C. difficile (VIDAS C. difficile Toxin A & B).

Как правильно подготовиться к анализу?

  1. Обязательно предупредите врача о всех препаратах, которые вы принимаете или принимали незадолго до сдачи анализа. Применение некоторых медикаментов может повлиять на результат анализа кала. Поэтому их применение необходимо приостановить или прекратить в период подготовки к сдаче анализа кала после консультации с вашим врачом.
  2. К препаратам, которые могут повлиять на результаты анализов кала, относятся следующие

-Противодиарейные препараты (Смекта, Неосмектин, Полифан, Имодиум, Энтерол) -Противогельминтные препараты (Немозол, Декарис, Вермокс, Гельминтокс) -Антибиотики — любые виды -Лечебные и очищающие клизмы -Слабительные препараты (Бисакодил, Экстракт сенны, Форлакс, Порталак) -НПВП — нестероидные противовоспалительные препараты (Аспирин, Парацетамол, Ибупрофен)

  1. В случае если вы за последние несколько месяцев были за пределами страны, следует сказать врачу о тех местах, где вы были. Паразиты, грибковые инфекции, вирусы и бактерии, которые встречаются в специфических странах, могут повлиять на результаты анализов.
  2. Нельзя использовать кал, который был в контакте водой, мочой или с чистящими и дезинфицирующими средствами, используемые для чистки унитаза, горшка.

Для предохранения от инфицирования при сборе пробы:

-не загрязнять наружную поверхность посуды при сборе и доставке проб,

-свести к минимуму непосредственный контакт пробы биоматериала с руками, т.к. это приводит к ошибочной трактовке результатов

-использовать стерильные одноразовые контейнеры (емкости) для сбора и доставки проб, которые приобретаются ТОЛЬКО !!! в регистратуре лаборатории, либо с маркировкой  стерильности и срока годности, указанной на контейнере , -собирать пробы в стерильную одноразовую не испорченную трещинами посуду.

Как правильно собрать кал для анализа?

-В течение 1-3 дней до забора материала на исследования из диеты обследуемых должна быть исключена острая пища,алкоголь,антимикробные препараты. -От момента последнего принятия пищи до взятия материала должно пройти не менее 8-10 часов -Пробу фекалий собирают после естественной дефекации. -Помочитесь перед сбором материала, для того чтобы моча не попала в кал. -Пробу фекалий собирают в стерильный герметичный контейнер с широким горлышком и плотно закручивающейся крышкой без консерванта. -Сбор фекалий необходимо производить стерильно из горшка, судна, с пеленки, памперса, из фекальной массы, не соприкасающейся со стенками горшка, судна или тканью пеленки. -Взятие материала нужно производить ложкой, впаянной в крышку контейнера. -Пробу для исследования берут из средней или последней порций фекалий из разных участков каловых масс (сверху, с боков, изнутри) Пробы берут в количестве около 2 г Материал (кал) кладется в выданный вам контейнер, и плотно закрывается. Необходимо подписать контейнер (Ваше имя и фамилию, дату и время сбора анализа)

Патогенные энтеробактерии (сальмонеллы, шигеллы — показатель серьезного инфекционного заболевания кишечника, а не дисбактериоза. 

Представители нормальной кишечной микрофлоры:

  • Бифидобактерии — Существенное снижение количества – всегда признак выраженного дисбактериоза. (N — не меньше 107 – 109).
  • Лактобактерии (лактобациллы, молочнокислые микробы, молочнокислые стрептококки). При дефиците – высокий риск развития аллергических заболеваний, запоров, лактазной недостаточности. (N — не меньше 106 – 107).
  • Кишечная палочка с нормальной ферментативной активностью (эшерихии). (N не менее 107 – 108). Снижение общего количества — косвенный признак присутствия в кишечнике не бактериальных паразитов (глистов, простейших). Приводит к снижению количества бифидобактерий. 

Снижение количества кишечной палочки с нормальной ферментативной активностью обычно не требует назначения коли-содержащих препаратов, т.к. чаще всего такое снижение является вторичным в ответ на существование в организме очагов хронической инфекции, инвазии, интоксикации (часто глистов и простейших) и кишечная палочка самостоятельно восстанавливается при ликвидации этих очагов и введении селективных субстратов активизирующих ее рост (напр., Витаминов). Назначение коли-содержащих препаратов на начальном этапе лечения дисбактериоза может спровоцировать воспалительные заболевания кишечника.

  • Кишечная палочка со сниженной ферментативной активностью – признак начинающегося дисбактериоза, и косвенный признак возможного присутствия в кишечнике глистов или простейших.
  • Бактероиды — роль неясна, но известно, что это – не вредные бактерии, обычно их количество не имеет практического значения

Условно-патогенная флора –лактозонегативные энтеробактерии (клебсиелла, протей, цитробактеры, энтеробактеры, гафнии, серрации), гемолизирующая кишечная палочка, клостридии, различные кокки (энтерококки, эпидермальные или сапрофитные стафилококки, золотистый стафилококк). Превышение N – говорит об ослаблении иммунитета. Возможны аллергические кожные реакции, нарушения стула (запоры, поносы, ярко-желтый или зелень и слизь в кале), боли в животе, вздутия живота, срыгивания, рвоты. При этом обычно температура тела не повышается. При выраженных формах дисбактериоза возможно попадание УПФ в кровь через кишечную стенку (транслокация), особенно у детей с выраженными иммунодефицитами, как правило, представляющими угрозу для жизни.

Кокковые формы в общей сумме микробов.

  • Золотистый стафилококк (S. aureus). — в норме должен отсутствовать. Даже небольшие его количества могут вызвать выраженные клинические проявления (аллергические реакции, гнойничковые кожные высыпания, дисфункции кишечника), особенно у детей первых месяцев жизни. Косвенный признак – ярко-желтый стул, сухость кожи на лице, сгибах рук и ног.

Патогенность напрямую зависит от состояния нормальной флоры: чем больше бифидобактерий, лактобактерий и нормальной кишечной палочки, тем меньше вреда от стафилококка.

  • Эпидермальный (или сапрофитный) стафилококк (S. epidermidis, S. saprophyticus)- могут вызывать нарушения, если их количество превышает 25%.
  • Энтерококки. Превышение N (более 107) чаще всего связано со снижением количества нормальной флоры. Могут вызывать воспалительные заболевания почек и мочевого пузыря.
  • Процент гемолизирующих кокков по отношению ко всем кокковым формам. Если общее количество кокков составляет, например, 16%, а процент гемолизирующих кокков – 50%, это значит, что половина из 16% — более вредоносные кокки, а их процент по отношению к нормальной флоре составляет 8%.
  • Протеи — чаще всего с ними связаны запоры;
  • Клебсиеллы — прямые антагонисты (конкуренты) лактобактерий, приводят к развитию аллергий, запоров, проявлениям лактазной недостаточности. Косвенный признак — зеленый стул со слизью, кислый запах кала (симптомы бродильной диспепсии).

Грибы рода Candida. Допустимо присутствие до 104. Превышение показателей N на фоне резкого снижения нормальной кишечной флоры и наличия кандидоза (молочницы) видимых слизистых оболочек (ротовая полость, половые органы) – это проявления системного кандидоза, то есть инфицирования грибами кишечника. Увеличение количества грибов в анализе без снижения нормальной кишечной флоры — грибы живут на коже вокруг заднего прохода, а не в кишечнике.

  • Клостридии — Допустимое количество до 107. Чаще всего вызывают разжижение стула, понос. Обычно проявляют патогенность в комплексе с другой условно-патогенной флорой. Косвенный признак- повышенное газообразование, тухлый запах кала, (симптомы гнилостной диспепсии).

Прочие микроорганизмы- редко встречающиеся виды бактерий, самым опасным из которых является синегнойная палочка (Pseudomonas aerugenosa).

06.09.2017

image

Очень часто пациенты при подготовке к сдаче анализа кала задают вопросы:

  • Каким образом собрать биоматериал?
  • Какое количество биоматериала достаточно для проведения исследования?
  • Как длительно возможно хранение кала? Как быстро нужно доставить кал в лабораторию?

В этой статье мы постарались подробно ответить на каждый из них. 

Итак, для того чтобы правильно собрать и доставить биоматериал (кал) в лабораторию  необходимо учитывать следующие условия:

  1. Емкость (контейнер) для сбора кала должны быть: одноразового использования, стерильный, пластиковый, с хорошо закрывающейся крышкой, желательно с встроенным шпателем/ложкой на крышке. 
  2. Сбор кала должен производиться сразу после естественной дефекации, использование клизмы запрещается.
  3. При назначении исследований кала на фоне специальной диеты, ее характер должен быть указан при назначении анализа.
  4. Рекомендуется отменить прием препаратов, влияющих на работу кишечника (слабительные, ректальные свечи), а также ферментов и препаратов, содержащих железо. 
  5. Детям сбор кала необходимо организовать при следующих условиях:
    • использовать горшок/судно, предварительно проведя дезинфекцию сосуда;
    • на дно горшка положить чистый лист бумаги;
    • кал собрать встроенным шпателем/ложкой на крышке в контейнер
    • недопустимо хранение кала в горшке, судне, др. сосудах, не предназначенных для сбора кала.
  6. Кал не должен содержать примеси мочи, а также отделяемого женских и мужских половых органов.
  7. Количество кала для лабораторного исследования 10-40г (это примерно 2 чайные ложки или 1 столовая ложка). Идеальный вариант сбора кала – утреннее время. К сожалению, на практике не всегда удается собрать биоматериал в утреннее время. Поэтому доставка биоматериала в лабораторию осуществляется в течение 2-4 часов после сбора кала, но не позднее 10-12 часов после дефекации при условии хранения в холодильнике при t +3-6 С. Исключение – бактериологические исследования кала – доставка в лабораторию должна осуществляться в течение 2-4 часов после дефекации, но не более 6 часов.
  8. Гигиенический туалет наружных половых органов не требуется.

Копрограмма

Для сбора биоматериала требуется подготовка в течение 3-5 дней на фоне специальной диеты, содержащей определенное количество белков, жиров, углеводов. Соблюдение данной диеты возможно только после консультации терапевта или педиатра. 

Исследования кала на скрытую кровь

Для сбора биоматериала необходимо исключить из рациона питания в течение 2-3 дней следующие продукты: мясо, рыбу, зеленые овощи, помидоры, препараты железа. Употребление вышеперечисленных продуктов могут дать ложноположительную реакцию. 

Исследования кала на углеводы (по Бенедикту)

Наиболее диагностическую значимость этот анализ имеет для детей до 1 года. Поэтому специальной подготовки не требует.

Исследования кала на кишечных паразитов методом высокого концентрирования на фильтрах PARASEP

При назначении исследования необходимо заранее получить специальный контейнер в лаборатории. 

Хранение биоматериала (кала) в домашних условиях не более 24 часов в холодильнике t +3-6 С. Длительное хранение биоматериала обеспечивает концентрат, находящийся в виде распыленного вещества на стенках контейнера, либо в виде раствора. 

Специальной подготовки к данному анализу не требуется.  

При назначении на исследования: дифференциальная ПЦР-диагностика инфекционных энтероколитов, антиген лямблий, антиген H.pylori, исследование кала на ротавирус, энтеровирус, норовирус – условия идентичные условиям при назначении исследования кала методом высокого концентрирования на фильтрах PARASEP.

Бактериологическое исследование испражнений (кишечный дисбактериоз, условно-патогенные энтеробактерии, возбудители дизентерии и сальмонеллеза)

Предварительная подготовка не требуется. Доставка биоматериала в лабораторию осуществляется в течение 2-4 часов после сбора кала, но не более 6 часов. 

Исключение: биоматериал на бактериологическое исследование возбудителей дизентерии и сальмонеллеза – кал, мазок. Доставка в лабораторию кала не более 6 часов, а мазка – 72 часа (так как пробирка содержит транспортную среду с длительным сроком хранения).

Взятие мазка осуществляется только квалифицированным медицинским работником. 

Исследование соскоба на гельминты

Взятие соскоба проводит квалифицированный медицинский работник.

Предварительная подготовка не требуется. 

Исследование соскоба на гельминты проводят только в утреннее время, до дефекации. Гигиенический туалет наружных половых органов запрещается.

image

Об авторе

Оцените статью
Рейтинг автора
4,8
Материал подготовил
Михаил Галушко
Гастроэнтеролог, кандидат медицинских наук, стаж - более 27 лет.
А как считаете Вы?
Напишите в комментариях, что вы думаете – согласны
ли со статьей или есть что добавить?
Добавить комментарий